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人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞,786-O*

簡要描述:人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞,786-O*
該細(xì)胞源自一位原發(fā)性腎透明細(xì)胞癌患者。該細(xì)胞有微絨毛和橋粒,能在軟瓊脂上生長。此細(xì)胞生成一種PTH(甲狀旁腺素)樣的多肽,與乳癌和肺癌中生成的肽相似,其N端序列與PTH相似,具有PTH樣活性,分子量為6000D。

  • 產(chǎn)  地:上海
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2024-08-25
  • 訪  問  量:1051

詳細(xì)介紹

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人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞,786-O*
該細(xì)胞源自一位原發(fā)性腎透明細(xì)胞癌患者。該細(xì)胞有微絨毛和橋粒,能在軟瓊脂上生長。此細(xì)胞生成一種PTH(甲狀旁腺素)樣的多肽,與乳癌和肺癌中生成的肽相似,其N端序列與PTH相似,具有PTH樣活性,分子量為6000D。。

 動物種別:人

性別:男
組織來源:腎;腎細(xì)胞腺癌
形態(tài):上皮細(xì)胞
 
培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基:RPMI-1640+10%FBS+1%PS

溫度:37℃

氣相:95%空氣,5%二氧化碳

    使用權(quán)限 A類 

    細(xì)胞用途僅供科研使用。

    方     式: 詳詢經(jīng)理

    人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞,786-O*

    使用權(quán)限 A類注意事項:
    細(xì)胞培養(yǎng)步驟
    一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
    1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
    2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
    3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
    二.細(xì)胞處理:
    1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
    2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
    對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
    1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
    2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
    3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
    4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
    對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
    方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
    方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
    3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
     

     
    注意事項:
    1. 收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
    2. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
     
     

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